商品详情
【培养条件】
DMEM,high glucose(Gibco cat:11995,或同配方) 10%胎牛血清
配套完全培养基(CellCook cat:CC4003R)
【传代比例】
1:4传代(培养面积比)
【传代方式】
消化30秒
【换液频率】
2~3天换液1次
【冻存液配方】
DMEM,high glucose+10%FBS+10%DMSO
【难度等级】
++
【培养要点】
细胞贴壁性较差,容易飘起来,37℃静置可重新贴壁
【特征特性】
293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株,即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体的扩增,促进蛋白的表达。293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产,还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产,如腺病毒及其他哺乳动物病毒。
药筛:通过慢病毒感染的方式将携带荧光的基因片段整合进细胞基因组,使细胞表达荧光蛋白,在荧光显微镜下可以进行观察,标记后的细胞非常容易进行追踪检测。由于是用慢病毒转染的方式,导致细胞荧光表达量的不确定性,为增强细胞荧光表达量可进行抗性筛选。
正常培养过程中定期(一个月2-3次或频率自定)用终浓度4ug/mL的嘌呤霉素追加筛选,冻存后复苏也建议可以追加筛选一次,不需要培养过程中每天都加药。