HepG2 2.2.15是抗HBV新药开发的一个良好的体外研究工具。该细胞株是用2个头尾相连的HBV-DNA全基因的重组质粒转染受体细胞HepG2而成，可在体外无限繁殖，能够长期稳定的向培养上清中分泌乙肝病毒表面抗原HBsAg，乙肝病毒e抗原HBeAg和完整的Dane颗粒，而且还能产生大量的复制中间体，是体外筛选抗HBV药物的良好模型。
图1：HepG2 2.2.15细胞的形态图
生长特性：与HepG2类似，上皮样呈片状的小岛形态，容易抱团聚集叠加生长
培养条件：MEM+10%胎牛血清（南美/澳洲级别）+1×非必需氨基酸+380ug/mL G418
传代比例：1:3传代，3-4天传代一次
传代方式：0.25%（含EDTA）胰酶消化5分钟，若细胞团较大可在细胞团脱落后轻轻吹散细胞继续消化1-2分钟
倍增时间：50-60 hours（DSMZ）
冻存液配方：完全培养基+10%DMSO
培养难点：细胞有堆叠生长的特性，消化后需要两天贴壁至完全摊开
图2：赛库生物HepG2 2.2.15细胞生产出库图
1.血清：HepG2 2.2.15对血清品质要求更高，建议用南美或澳洲级别的胎牛血清培养。
2.细胞堆叠生长：细胞呈紧密连接的片状，堆叠生长属于正常现象。因此所需消化时间较久，在消化过程中，耐心等待细胞自然脱落，切勿拍打培养瓶或者过度吹打细胞，避免细胞损伤。
3.贴壁慢、漂浮细胞多：与Hep G2一样，HepG2 2.2.15复苏/传代后需要2-3天的时间才能完全贴壁伸展开，建议在此期间不要挪动细胞，让细胞充分贴壁后再进行观察。
参考文献：
1.Sells MA, Chen ML, Acs G. Production of hepatitis B virus particles in Hep G2 cells transfected with cloned hepatitis B virus DNA.Proc Natl Acad Sci USA.1987 Feb;84(4):1005-9.
doi: 10.1073/pnas.84.4.1005. PMID: 3029758; PMCID: PMC304350.
2.Ogura N, Ogawa K, Watashi K, Ito T, Wakita T. Novel stable HBV producing cell line systems for expression and screening antiviral inhibitor of hepatitis B virus in human hepatoma cell line. Biochem Biophys Res Commun. 2018 Mar 25;498(1):64-71.
doi: 10.1016/j.bbrc.2018.02.175. Epub 2018 Feb 24. PMID: 29481805.
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