■ H9C2细胞由KIMES B和BRANDT B从BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆得到；表现出许多骨骼肌的特性。

■ 这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管，并对乙酰胆碱的刺激发生反应。

■ 如果培养基中的血清浓度下降到1%，融合很快发生。

本文为大家介绍H9C2的培养条件及注意事项
 

一、培养条件

■ 生长特性：贴壁

■ 形态特征：成纤维细胞样

■ 培养条件：DMEM(改良型) +10%胎牛血清(进口南美级别）

■ 传代比例：1:3传代（培养面积比）

■ 传代方式：消化1分30秒

■ 换液频率：2~3天换液1次

■ 冻存液配方：DMEM(改良型)+10%FBS+10%DMSO

■ 培养要点：建议使用改良型DMEM培养基培养

二、常见问题

01

为什么会出现空泡？

可能是铺板时铺得不够均匀，局部过于密集，密集地方的细胞状态会变差、空泡增多。也可能是血清品质较差，要更换优质血清，及时换液

02

为什么细胞长得慢？

a

细胞密度低或细胞铺得不均匀，细胞长不起来，可以先培养，然后消化重新种瓶，提高密度培养或直接重新消化接种培养。

b

操作时力度没控制好，力度过大将细胞吹碎，状态变差。

c

血清品质较差，影响细胞生长，建议更换高品质血清。

03

H9C2细胞状态差，容易漂？

a

可能是血清问题，建议换高品质血清，并注意血清要程序解冻，不能水浴化开；

b

也有可能是细胞没铺匀，局部生长密集，需要及时传代，并不是细胞长满才传代，当有个别地方长得过于密集，容易叠加的时候应该就要传代了。

参考文献

[1] Li Y,  Fu L,  Zhang J, et al. CircularRNA circ_0071269 knockdown protects against from diabetic cardiomyopathy injury by microRNA-145/gasdermin A axis[J]. Bioengineered, 2022, 13(2):2398-2411.  

DOI:10.1080/21655979.2021.2024688

[2] Liu X, Wang M,  Li Q, et al. CircRNA ACAP2 induces myocardial apoptosis after myocardial infarction by sponging miR-29[J]. Minerva Medica, 2020. 

DOI:10.23736/S0026-4806.20.06600-8

[3] Sun L, Wang H, Xu D,  et al. Lapatinib induces mitochondrial dysfunction to enhance oxidative stress and ferroptosis in doxorubicin-induced cardiomyocytes via inhibition of PI3K/AKT signaling pathway[J]. Bioengineered, 2021, 13(1). 

DOI:10.1080/21655979.2021.2004980

[4] Wen Z,  Mai Z,  Zhu X,  et al. Mesenchymal stem cell-derived exosomes ameliorate cardiomyocyte apoptosis in hypoxic conditions through microRNA144 by targeting the PTEN/AKT pathway[J]. Stem Cell Research & Therapy, 2020, 11(1).

DOI：10.1186/s13287-020-1563-8    (此文献H9C2细胞购自赛库生物）