Hep G2人肝癌细胞。该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、Α-2-巨球蛋白、Α-1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、Α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、Α-1酸性糖蛋白、Α-2-HS-糖蛋白、Β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白；表达胰岛素受体和胰岛素样生长，适合用于肝细胞代谢方面的研究。
图一：ATCC中Hep G2细胞形态
本文为大家介绍Hep G2生长特性和常见问题解决策略。
生长特性
上皮样呈片状的小岛形态，容易抱团聚集叠加生长：
图二：Hep G2细胞
图三：Hep G2细胞
培养条件
培养体系
MEM+10%胎牛血清（南美级别）+添加剂:1X 非必需氨基酸。
传代比例
1:4传代（培养面积比）。
传代方式
0.25%胰酶消化5分钟。
换液频次
每周换液两次。
倍增时间
25.65 小时（PubMed= 31378681); 50-60 小时 (DSMZ)。
冻存液配方
MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO。
培养要点
细胞有堆叠生长特性，消化后需两天贴壁至完全摊开；生长较慢。
常见问题
01 叠加生长
Hep G2细胞生长特性是紧密连接成片状从四周延展增殖，形成一座座的小岛状，细胞在增殖过程中可能会看到轻微的细胞堆积点，属于正常现象，所以消化所需时间较久，注意观察，等待细胞自然脱落即可，切勿拍打培养瓶或过度吹打细胞，避免细胞损伤。
01 贴壁慢、漂浮细胞多
Hep G2细胞传代后会有许多簇状仍处于悬浮状态，这是正常现象，一般2-3天内会缓慢粘附于培养瓶缓慢延伸进行增殖。建议传代后2天内减少观察和移动细胞。
当冻存细胞进行复苏时，通常会出现大量漂浮细胞不贴壁，属于正常情况，刚复苏的细胞比较脆弱，建议3 天不要干扰，如果3天后漂浮细胞还很多，且漂浮细胞透亮圆润，可以重新收集细胞1000rmp、离心5分钟接种到新的培养瓶。
注
必要时可以提高血清浓度至15%辅助细胞更快贴壁增殖
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