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永生化就能无限传代?有些概念你需要清楚
发布日期:2022.05.20
永生化=无限传代?
肿瘤=永生化?
成瘤性=肿瘤?
成瘤性=永生化?
 
以上四对概念不知道大家搞清楚了没?我们一起带大家捋一捋。
 
首先,我们先来说说永生化。永生化就是通过细胞自身的基因变化或外界的各种刺激因素,使正常的细胞突破了正常的细胞衰老,延长了其复制能力,甚至使细胞无限增殖的过程。正常细胞在体外的增殖次数是有限的。永生化正是利用细胞自发的,或通过转基因或其他刺激等使细胞能顺利突破增殖次数的限制,减少科研工作者从组织中分离原代细胞的次数的一种手段。一般情况下,人类细胞的自发永生化的概率非常低,所以一般通过导入诸如SV40、hTERT、HPVE6/E7等基因的方法使细胞永生化。虽然理论上,永生化是可以让细胞获得无限增殖的能力,但在实际操作中,可能会因为细胞的来源、类型、所选用的基因是否合适等情况,而使所获得的“永生化”细胞未能获得无限增殖的能力。其中一个例子就是中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心所构建的一株细胞PUMC-HUVEC-T1,该细胞希望通过导入SV40T基因进行永生化,但细胞在体外也仅能传至40代,之后细胞开始衰老,而并不能无限传代。综上,虽然永生化理论上是可以使细胞无限传代,但实际中还是需要去测试才知道具体效果。
 
 
正如上面说到的,永生化针对的主要是正常细胞,目的是使正常细胞能够突破复制的限制。而对于肿瘤细胞,一般由于自身的基因突变而获得了无限增殖的能力,所以是不需要额外进行永生化处理的,因为永生化操作就是模仿着细胞癌化的过程导入致癌基因或抑制抑癌基因。所以一般的肿瘤是不需要进行永生化处理就已经具有无限传代的能力。就如第一株人类细胞株Hela细胞,从1956年建系到现在,通过传代所产生的生物量早已按吨算,但该细胞从未进行过永生化处理
 
 
细胞永生化
 
 
在ATCC网站上,部分细胞是有Tumorigenic的信息,该单词反映的是细胞在免疫抑制的小鼠中的成瘤能力。例如,我们常用的HepG2细胞,在ATCC上的信息就是不成瘤(对的,在裸鼠中不成瘤,如果看到文献说HepG2成瘤,那大概率是所用的细胞不正确)。成不成瘤是细胞株自身的特性,与是否肿瘤细胞并不相关,上面的HepG2就是一个很好的例子。下面我们举另外一个例子,就是MC3T3-E1Subclone 14细胞。该细胞是一株自发永生化的正常细胞,在ATCC网站上Tumorigenic一栏是Yes,虽然显示的是形成骨样小骨,但ATCC还是标注了有成瘤性。综上可以看出,成瘤性与是否肿瘤或是否正常细胞都没有关系,肿瘤细胞也可以没有成瘤性,正常细胞也可以有成瘤性。
 
由上面的例子也可以看出,成瘤性与是否永生化也没有关系,大部分永生化的正常细胞仍然是不成瘤的,但也有少部分可以,上面的MC3T3-E1 Subclone 14就是例子。而大部分没有永生化的肿瘤细胞是能成瘤的,但也有不成瘤的,HepG2是其中之一。
 
由此可以看出,永生化、肿瘤、成瘤性和无限传代都是不同的概念,彼此之间没有十分必然的联系,不能从一个推导出另一个特性。大家在使用细胞的时候也要注意去区分,不要混淆。
 
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