商品详情
【培养条件】
DMEM,high glucose(Gibco cat:11995,或同配方) 10%胎牛血清 添加剂: 0.5mg/ml G418 0.5mg/ml潮霉素B
【推荐培养试剂】
配套完全培养基(CellCook cat:CC90103M)
【传代比例】
1:4传代(培养面积比)
【传代方式】
消化2-3分钟
【换液频率】
2~3天换液1次
【冻存液配方】
DMEM,high glucose+10%FBS+ 0.5mg/ml G418+0.5mg/ml潮霉素B+10%DMSO
【难度等级】
+
【培养要点】
具体的上清收集步骤请参考ATCC网站
【特征特性】
该细胞是用R- spondin 3和noggin共表达载体转染L-Wnt3A(ATCC CRL-2647)而获得,并在含有G418和潮霉素B的培养基中选择的稳定表达克隆。L-WRN细胞向培养基中分泌Wnt3A、R-spondin 3和noggin因子。Wnt3A结合卷曲基因受体家族并激活β-连环蛋白依赖性转录。r-spondin蛋白家族的成员是肠道中典型Wnt信号的有效共激活剂,对分离小肠干细胞至关重要。Noggin是一种骨形态发生蛋白(BMP)信号抑制剂,能够在体外维持和使小肠类器官传代。尽管这三种因子