商品详情
【培养条件】
RPMI 1640(Gibco cat:11875,或同配方) 10%胎牛血清
【推荐培养试剂】
配套完全培养基(CellCook cat:CC9022L)
【传代比例】
1:4传代(培养面积比)
【传代方式】
消化6-10分钟(培养箱消化)
【换液频率】
每周换液2-3次
【冻存液配方】
RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【难度等级】
++
【培养要点】
80%汇合度时传代,不可长满;细胞在生长过程中会有部分漂浮、碎片较多的情况,无需频繁换液,可在传代前用PBS清洗1-2遍
【特征特性】
4T1是从410.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌呤抗性细胞株。当注射到BALB/c小鼠中时,4T1自发产生高转移肿瘤,可转移到肺,肝,淋巴结和大脑,同时在注射部位形成始发灶。诱导转移时不需要摘除始发灶。4T1细胞在BALB/c小鼠中的生长与转移特性与人体中的乳腺癌十分相近。这种肿瘤是人VI期乳腺癌的动物模型。4T1诱导的肿瘤在手术后及未手术情况下转移的动力学相近,可以用作手术后及未手术模型。跟其他肿瘤模型相比,由于4T1的抗6-硫鸟嘌呤特性,微小的转移细胞团(少到仅仅1个)也可在远距离组织中检测出来,比大
部分肿瘤模型都更加准确,因为不需要数结节数或者称量靶标组织重量。
药筛:通过慢病毒感染的方式将携带荧光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合进细胞基因组,使细胞表达荧光蛋白,常用于构建各类皮下、原位或转移型的CDX肿瘤模型、活体动物体内光学成像实验和启动子活性分析等。由于是用慢病毒转染的方式,导致细胞荧光表达量的不确定性,为增强细胞荧光表达量可进行抗性筛选。荧光株培养条件与野生型细胞一致。连续培养的细胞筛选频率为1-2个月,筛选时,将嘌呤霉素直接添加到培养基中,细胞正常培养传代即可,每次筛选时间为一周,嘌呤霉素终浓度为4μg/mL。长期冻存的细胞,复苏后第二代待细胞状态稳定时,可进行筛选,维持阳性细胞比例。筛选过程中,建议不要使用细胞做实验,抗生素会影响部分实验结果。