商品详情
【培养条件】
MEM(Gibco cat:11095,或同配方) 10%胎牛血清 添加剂:1X 非必需氨基酸(CellCook cat:CM1008S/L)
【推荐培养试剂】
配套完全培养基(CellCook cat:CC1101L)
【传代比例】
1:4传代(培养面积比)
【传代方式】
消化2-3分钟
【换液频率】
2~3天换液1次
【冻存液配方】
MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO
【难度等级】
+
【培养要点】
暂无
【特征特性】
HeLa是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系,它由Gey GO等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察,Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV18序列,需在2级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性,p53表达量较低,但表达正常水平的pRB(视网膜母细胞瘤抑制因子)。
药筛:通过慢病毒感染的方式将携带荧光素酶(Luciferase,Luc)的基因片段整合进细胞基因组,使细胞表达荧光蛋白,常用于构建各类皮下、原位或转移型的CDX肿瘤模型、活体动物体内光学成像实验和启动子活性分析等。由于是用慢病毒转染的方式,导致细胞荧光表达量的不确定性,为增强细胞荧光表达量可进行抗性筛选。荧光株培养条件与野生型细胞一致。连续培养的细胞筛选频率为1-2个月,筛选时,将嘌呤霉素直接添加到培养基中,细胞正常培养传代即可,每次筛选时间为一周,嘌呤霉素终浓度为4μg/mL。长期冻存的细胞,复苏后第二代待细胞状态稳定时,可进行筛选,维持阳性细胞比例。筛选过程中,建议不要使用细胞做实验,抗生素会影响部分实验结果。