商品详情
【培养条件】
MEM(GIBCO CAT:11095,或同配方) 10%胎牛血清 添加剂:10UG/ML胰岛素(CELLCOOK CAT:CM1007),1X 非必需氨基酸(CELLCOOK CAT:CM1008S/L)
【推荐培养试剂】
【传代比例】
不高于1:3传代(培养面积比)
【传代方式】
消化3-5分钟
【换液频率】
每周换液2-3次
【冻存液配方】
MEM+10%FBS+10UG/ML胰岛素+1X 非必需氨基酸+10%DMSO
【难度等级】
++
【培养要点】
细胞贴壁较慢,完全摊开需2天
【特征特性】
该细胞是从一名69岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离建立的。该细胞保留了多个分化乳腺上皮的特性,包括:能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成隆突结构(DOMES);该细胞表达WNT7B癌基因;TNF-Α可以抑制MCF-7细胞的生长;抗雌激素处理能调节细胞胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)的分泌。
药筛:通过慢病毒感染的方式将携带荧光的基因片段整合进细胞基因组,使细胞表
达荧光蛋白,在荧光显微镜下可以进行观察,标记后的细胞非常容易进行追踪检
测。由于是用慢病毒转染的方式,导致细胞荧光表达量的不确定性,为增强细胞荧
光表达量可进行抗性筛选。
荧光株培养条件与野生型细胞一致。正常培养过程中定期(一个月2-3次或频
率自定)用终浓度4μg/mL的嘌呤霉素追加筛选,冻存后复苏也建议可以追加筛选
一次,不需要培养过程中每天都加药。