商品详情
【培养条件】
DMEM(改良型)(CellCook cat:CM2007) 10%胎牛血清
【推荐培养试剂】
配套完全培养基(CellCook cat:CC9044G)
【传代比例】
1:3传代(培养面积比)
【传代方式】
悬浮部分离心收集(1000rpm,5分钟),贴壁部分消化2-3分钟
【换液频率】
2~3天换液1次
【冻存液配方】
DMEM(改良型)+10%FBS+10%DMSO
【难度等级】
+
【培养要点】
悬浮与贴壁混合,需要将培养基中的悬浮细胞与消化完成的贴壁细胞一并离心收集再做传代
【特征特性】
细胞对1,3-bis-(2-chloroethyl)-1-nitrosourea耐药但对甲氨蝶呤敏感。有文章报道细胞有高致瘤性,但在鼠中低转移。培养皿中会堆叠生长而不完全汇合。鼠痘病毒阴性。
药筛:通过慢病毒感染的方式将携带荧光的基因片段整合进细胞基因组,使细胞表达荧光蛋白,在荧光显微镜下可以进行观察,标记后的细胞非常容易进行追踪检测。由于是用慢病毒转染的方式,导致细胞荧光表达量的不确定性,为增强细胞荧光表达量可进行抗性筛选。正常培养过程中定期(一个月2-3次或频率自定)用终浓度4ug/mL的嘌呤霉素追加筛选,冻存后复苏也建议可以追加筛选一次,不需要培养过程中每天都加药。