NK(Natural killer)细胞,也称自然杀伤细胞,因为其非专一性的细胞毒杀作用而被命名。形态上属于大颗粒淋巴细胞,来源于骨髓,是除T细胞、B细胞之外的第三大类淋巴细胞,约占血液中所有免疫细胞(白细胞数量)的15%,属于天然免疫系统的核心细胞,主要分布于外周血、肝脏和脾脏。
NK细胞具有部分T细胞分化抗原,如80%~90%的NK细胞呈CD2+,以及75%~90%的NK细胞呈CD38+,而且NK细胞具有IL-2中亲和性受体,在IL-2刺激下可发生增殖反应,活化的NK细胞可产生IFN-γ。NK细胞是人体抵抗癌细胞和病毒感染的第一道防线,可非特异性识别并消除肿瘤细胞,这种天然杀伤活性无MHC限制,也不需要抗体参与。除了具有强大的杀伤功能外,NK细胞还具有很强的免疫调节功能,与机体其他多种免疫细胞相互作用,调节机体的免疫状态和免疫功能。
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NK-92细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2(IL-2)依赖型的NK细胞株。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562和DAUDI细胞。NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。
NK-92细胞有以下特征:CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面标记阳性;CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面标记阴性。
NK-92/MI细胞,是通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2cDNA对NK-92进行转化,得到的IL-2非依赖的NK细胞株。
NK92:100X;200X
3、冻存液配方:冻存时细胞数量应在0.5-1.0×106/ml;
NK-92:50%胎牛血清+40%完全培养基+10%DMSO;
NK-92MI:90%胎牛血清+10%DMSO。
3、IL-2保存于-20℃,4℃保存不超过两周。
4、含有IL-2的完全培养基建议现用现配或保存于4℃冰箱中两周内用完,使用前恢复至室温即可,切勿加热。