
做细胞实验的科研人大概都遇过这样的糟心事儿:相同的操作、相同的细胞系,实验结果却天差地别,甚至连自己的实验都复现不了。你以为是操作失误,殊不知,胎牛血清(FBS) 这个细胞培养的基础试剂,可能就是影响实验重复性的关键隐藏因素!


2023年发表在Scientific Reports的一篇研究论文中,来自中国的科研工作者进行了一次有意思的探索,研究显示:不同品牌、不同来源的胎牛血清,会对上皮细胞中炎症因子IL-8的基础表达产生显著差异影响,而这一差异正是由血清中的内源性小分子决定的。这也解释了为什么很多免疫相关细胞实验,总在重复性上栽跟头。
研究团队选取了南美、澳大利亚、新西兰三大主产区的8个常用品牌胎牛血清,用HCT-8、HT-29上皮细胞做验证,结果发现了明显的“两极分化”:Gibco(南美/澳版)、Corning(新西兰)、Bovogen(新西兰)等4款血清,能显著诱导细胞分泌IL-8;而ExCell Bio、Biological Industries、Hyclone等4款血清,对IL-8表达则无明显作用,且所有血清均未影响TNFα、IL-1β的分泌。


更关键的是,研究找到了背后的作用机制:血清中<3KD的小分子成分,会通过激活pERK信号通路促进IL-8的表达,而用pERK特异性抑制剂U0126处理后,这一诱导作用会完全消失。

代谢组分析进一步发现,能诱导分泌IL-8的血清相比无诱导作用的血清,其培养细胞的代谢谱存在显著差异——前者有12种代谢物上调、19种下调,其中1-棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱的含量更是高出后者54.28倍,且这些差异代谢物主要来源于氨基酸代谢。



其实早有数据显示,近80%的生物学者无法复现他人实验,并且60%复现不了自己的实验,除了细胞系污染、操作差异,胎牛血清的“不标准化”也是重要原因。不同品牌、批次的血清,因供体牛的生理状态、生长环境、产地气候不同,成分差异显著,这是导致实验结果重复性差的重要原因之一。
对于做细胞实验的我们,这一研究给出了明确的实操建议:
✅ 开展免疫相关实验时,需将血清代谢物纳入实验设计的定量考量
✅ 把IL-8表达水平作为筛选胎牛血清的重要标志物,根据实验需求选择适配血清
✅ 实验记录中明确标注血清的品牌、批次、产地,为实验可重复提供基础
✅ 同一实验全程使用同品牌同一批次血清,减少批次间差异带来的实验误差
赛库生物建有超千株细胞系的大型细胞资源库,并拥有十年深耕细胞培养领域的实战经验。长期的细胞保种与传代培养工作,使我们对血清品质与批次稳定性有着极为严苛的要求。基于自有细胞库的大量验证数据,我们对多款主流血清产品进行了多细胞系、多代次、多指标的平行对比测试,从细胞增殖、形态、活性及长期传代稳定性等关键维度综合评估,最终筛选并推出适配本司细胞系、可支持长期稳定培养的专用优质血清。


参考文献:Liu S, Yang W, Li Y, Sun C. Fetal bovine serum, an important factor affecting the reproducibility of cell experiments. Sci Rep. 2023 Feb 2;13(1):1942. doi: 10.1038/s41598-023-29060-7. PMID: 36732616; PMCID: PMC9894865.

























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