培养条件:BEGM(CellCook cat:CM2010)
针对该细胞我们可以提供完全培养基,该培养基是针对该细胞长期测试而来,可保持细胞最佳生长状态,建议随细胞进行购买。
传代方法:1:3-1:4传代,消化(0.05%胰酶-0.53 mM EDTA&0.5% polyvinylpyrrolidone (PVP)(CellCook cat:CM1021))3 分钟,每周换液2-3次。
冻存液配方:81.5% L-15(CellCook cat:CM2001S),10mM HEPES, 1% PVP(CellCook cat:CM1021), 10% FBS, 7.5% DMSO
难度等级:++++
培养要点:需使用BEGM培养基培养,终止消化时需使用胰蛋白酶抑制剂(CellCookcat:CM1017),以防止细胞黏连成团。培养器皿建议使用0.01mg/mL黏连蛋白、0.03mg/mLI型胶原和0.01mg/mL BSA处理,以增加细胞贴附;赛库目前使用Poly-L-lysine(PLL)(CellCook cat:CM1020)作为替代方案。血清会抑制细胞生长,复苏时应漂洗冻存液后再种板。
另,赛库可提供“HET-1A配套试剂(CellCook cat:CM1022)——含:胰蛋白酶抑制剂(5 mg/mL) 20ml(CellCook cat:CM1017)、Poly-L-lysine(PLL)(1mg/ml) 1ml(CellCook cat:CM1020)、polyvinylpyrrolidone (PVP) 1g(CellCook cat:CM1021)、L-15 50ml(CellCook cat:CM2001S)”
附,Poly-L-lysine(PLL)(1mg/ml) 1ml(CellCook cat:CM1020)使用铺板方法:用无菌水按1:100稀释成10ug/ml工作液,0.22um滤膜过滤后备用,加7ml到100mm培养皿(4-5ml到T25培养瓶),放无菌环境中,过夜后吸出或自然风干。
特征特性:钙可以刺激细胞生长,胎牛血清、TGF-β1和TGF-β2抑制细胞生长。伏马菌素B1会抑制细胞生长,同时引起细胞凋亡。CD437会通过caspase3依赖通路引起细胞凋亡。
STR位点信息:
STR Profile | AMEL | CSF1PO | D13S317 | D16S539 | D5S818 | D7S820 | TH01 | TPOX | vWA |
Het-1A | X, Y | 10, 12 | 11 | 9, 11 | 11, 12 | 9 | 7 | 11 | 16 |