培养条件: Alpha MEM(CellCook cat:CM2003) ,12.5%马血清(CellCook cat:CM1001) ,12.5%胎牛血清 ,添加剂:0.2mM肌醇,0.1mM巯基乙醇,0.02mM叶酸,100-200U/ml IL-2(Cellcook cat:CM1014)
针对该细胞我们可以提供专用培养基,该培养基是针对该细胞长期测试而来,可保持细胞最佳生长状态,建议随细胞进行购买。
传代方法:1:2传代,初始细胞密度2*10^5-3*10^5cells/ml,可以通过添加或更换培养基维持细胞。细胞对过度生长或养分枯竭极度敏感。维持细胞浓度在2*10^5-1*10^6cells/mL。根据细胞密度每2-3天换液。
倍增时间:35.6 +- 6.1 hours(PubMed=31126350); ~40-50 hours (DSMZ)
冻存液配方:50%胎牛血清+ 40%完全培养基+10%DMSO
难度等级:++++
培养要点:使用指定培养基配方,且对IL-2依赖,建议使用高质量IL-2进行培养,细胞对养分及氧气敏感,需定期更换培养基及控制细胞密度,且细胞生长速度较NK92/MI缓慢。具体细节可登陆公司网站进行查看
特征特性:NK-92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。NK-92细胞有以下特征:CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面标记阳性,CD56亮;CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20, CD23, CD34和HLA-DR阴性。PCR检测细胞存在EBV的DNA序列。
STR位点信息:
STR Profile | AMEL | CSF1PO | D13S317 | D16S539 | D5S818 | D7S820 | TH01 | TPOX | vWA |
NK92 | X, Y | 11,12 | 9,12 | 11,12 | 12,13 | 10,11 | 6,9.3 | 8 | 18 |